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    轉基因大豆MON87705品系核酸檢測試劑盒?反應五要素

    點擊次數:1036  更新時間:2021-10-13

    轉基因大豆MON87705品系核酸檢測試劑盒反應五要素:


    參加PCR反應的物質主要有五種即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+


    引物:引物是PCR特異性反應的關鍵,PCR 產物的特異性取決于引物與模板DNA互補的程度。理論上,只要知道任何一段模板DNA序列, 就能按其設計互補的寡核苷酸鏈做引物,利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴增。設計引物應遵循以下原則:


    ①引物長度: 15-30bp,常用為20bp左右。


    ②引物擴增跨度: 以200-500bp為宜,特定條件下可擴增長至10kb的片段。


    ③引物堿基:G+C含量以40-60%為宜,G+C太少擴增效果不佳,G+C過多易出現非特異條帶。ATGC*隨機分布,避免5個以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。


    ④避免引物內部出現二級結構,避免兩條引物間互補,特別是3'端的互補,否則會形成引物二聚體,產生非特異的擴增條帶。


    ⑤引物3'端的堿基,特別是最末及倒數第二個堿基,應嚴格要求配對,以避免因末端堿基不配對而導致PCR失敗。


    ⑥引物中有或能加上合適的酶切位點, 被擴增的靶序列*有適宜的酶切位點, 這對酶切分析或分子克隆很有好處。


    ⑦引物的特異性:引物應與核酸序列數據庫的其它序列無明顯同源性。


    引物量:每條引物的濃度0.1~1umol或10~100pmol,以*引物量產生所需要的結果為好,引物濃度偏高會引起錯配和非特異性擴增,且可增加引物之間形成二聚體的機會。

    蛋白激酶A2抗體

    血管緊張素Ⅱ受體2抗體

    ASH1蛋白抗體

    芳香乙酰胺脫乙酰基酶樣蛋白2抗體

    血管內皮細胞遷移蛋白抗體

    醛糖還原酶相關蛋白質抗體

    膽汁酸結合蛋白DDH2抗體

    血管生成素樣蛋白3抗體

    甘油酯激酶線粒體抗體

    磷酸化內收蛋白a1抗體

    自噬體ATG16L2蛋白抗體

    睪丸酸性磷酸酶抗體

    酸性磷酸酶抗體

    極光激酶A相互作用蛋白1抗體

    載脂蛋白樣蛋白6抗體

    凋亡相關蛋白TGFb信號抗體

    A2LD1蛋白抗體

    α1,4-N-乙酰葡糖胺轉移酶α4Gn-T抗體

    芳香乙酰胺脫乙酰基酶抗體

    芳香乙酰胺脫乙酰基酶樣蛋白4抗體

    氨基乙二酸半醛脫氫酶磷酸泛酰巰基乙胺轉移酶抗體

    賴氨酸酮戊二酸還原酶抗體

    錨蛋白重復域6抗體

    精氨酸酶2抗體

    醛固酮還原酶家族1成員C3抗體

    促腎上腺皮質激素受體

    褐黑素相關蛋白ART抗體

    腎上腺皮質線粒體鐵氧還蛋白抗體


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