商品屬性：

背景：

IFN-γ，也稱為IFNG，屬于I I型干擾素家族的一種分泌的蛋白質。 IFN-γ主要由自然殺傷性T細胞（NK）產生。NK細胞作為天然免疫應答的組成部分，一旦抗原特異性免疫產生，CD4和CD8細胞毒性T淋巴細胞效應就會產生。 IFN-γ具有抗病毒，免疫調節和抗腫瘤特性。 IFNG除具有抗病毒活性:外，還具有重要的免疫調節功能，它是巨噬細胞的有效活化因子，對轉移的腫瘤細胞具有抗增殖作用，并且可以增強I型干擾素的抗病毒和抗腫瘤作用。IFN-γ單體包含一個有六個α螺旋的核心和一個在C端區域延伸的未折疊序列:組成。 IFN-γ對于抵抗病毒和細胞內細菌感染的先天性和獲得性免疫應答以及控制腫瘤至關重要。 IFN-γ的異常表達與許多自身炎癥和自身免疫疾病有關。 IFN-γ在免疫系統中的重要性部分源于其直接抑制病毒復制的能力，重要的是源于其免疫刺激和免疫調節作用。

標記：

1.將細胞培養基與EdU溶液按照500：1的比例混合，制成2×EdU標記培養基。

2.提前將2×EdU標記培養基預熱，然后將150微升2×EdU標記培養基與等體積細胞培養基混合，獲得1×EdU溶液。

【注】：①不建議替換全部培養基，這樣可能會影響細胞增殖的速度。②配置好的培養基建議現用現配，用量以沒過細胞為宜。

3.孵育細胞2 h，棄培養基。

【注】：①培養時間取決于細胞的增殖速度和生長狀態。②大多數腫瘤細胞以及粘附細胞系均可采用2 h的孵育時間。

4.以1xPBS清洗細胞兩次，每次5 min, 以除去未摻入DNA的EdU殘留。

【注】：對于貼壁不牢的細胞可降低清洗強度。

實驗步驟：

1. 將細胞以 104-105 個細胞/孔的密度接種在 96 孔板 中，加入 100μL 培養基，含或不含待測化合物。在 CO2 培養箱中在 37℃ 下培養細胞 24 小時。

2. 向板中加入 10μL 不同濃度的待測物質。

3. 在培養箱中將培養板培養適當時間（如 6、12、24 或 48 小時）。

4. 向板的每個孔中加入 10μL CCK-8 溶液。小心不要將氣泡引入孔中。

5. 將平板在培養箱中孵育 1-4 小時。

6. 在讀板之前，在定軌振蕩器上輕輕混勻。

7. 使用酶標儀測量 450nm 處的吸光度。

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