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大鼠骨骼肌衛(wèi)星細(xì)胞

型 號(hào)

產(chǎn)品時(shí)間2024-12-06

所屬分類大鼠原代細(xì)胞

報(bào)價(jià)2600

產(chǎn)品描述:大鼠骨骼肌衛(wèi)星細(xì)胞公司正在出售的產(chǎn)品:石蠟切片組織鈣鈉交換體(NCX)蛋白表達(dá)NBT顯色光學(xué)顯微鏡檢測(cè)試劑盒
細(xì)胞鈣鈉交換體(NCX)蛋白表達(dá)比色法定量檢測(cè)試劑盒
細(xì)胞鈣鈉交換體(NCX)蛋白表達(dá)熒光定量檢測(cè)試劑盒
鈣鈉交換體(NCX)蛋白表達(dá)西方雜交分析試劑盒
鈣鈉交換體(NCX)蛋白免疫共沉淀分析試劑盒

產(chǎn)品概述

原代細(xì)胞的分離培養(yǎng):

原代培養(yǎng)即直接從有機(jī)體取下細(xì)胞、組織或器官,讓它們?cè)隗w外維持與生長(zhǎng)。原代培養(yǎng)的特點(diǎn)是細(xì)胞或組織剛離開(kāi)機(jī)體,它們的生物性狀尚未發(fā)生很大的改變,在一定程度上可反映它們?cè)隗w內(nèi)的狀態(tài),表現(xiàn)出來(lái)源組織或細(xì)胞的特性, 因此用于藥物實(shí)驗(yàn),尤其是藥物對(duì)細(xì)胞活動(dòng)、結(jié)構(gòu)、代謝、有無(wú)毒性或殺傷作用等,是的工具。常用的原代培養(yǎng)法有組織塊培養(yǎng)法和消化培養(yǎng)法。

(一)組織塊培養(yǎng)法

許多實(shí)驗(yàn)室喜歡用組織塊培養(yǎng)法進(jìn)行原代培養(yǎng),因?yàn)榉椒ê?jiǎn)單,細(xì)胞也較容易生長(zhǎng)。尤其是培養(yǎng)心肌,有時(shí)還可觀察到心肌組織塊搏動(dòng)。細(xì)胞從組織塊邊緣向外長(zhǎng)出并鋪滿培養(yǎng)皿或培養(yǎng)瓶后, 即可進(jìn)行傳代。

1. 設(shè)備材料

培養(yǎng)箱、冰箱、超凈工作臺(tái)/無(wú)菌間、無(wú)菌吸管、離心管、酒精燈、試管架、培養(yǎng)瓶、培養(yǎng)皿、消化液、基礎(chǔ)培養(yǎng)液、胎牛血清、Hanks 溶液、雙抗試液、剪刀、攝子、小燒杯。

2. 操作步驟

(1) 在無(wú)菌條件下,取待培養(yǎng)的組織適量,置入小燒杯中, 以適量Hanks 溶液清洗2~3 次,去掉組織塊表面的血污。

(2)用眼科剪將組織塊反復(fù)剪成0.5~ 1mm3的小塊。

(3)再用Hanks 溶液反復(fù)漂洗, 直至液體不混濁為止。等組織塊下沉,將燒杯傾斜,用小吸管盡量吸除Hanks 溶液。

(4)用含20%滅活血清及雙抗溶液(200U/ml、200μg/ml)的培養(yǎng)液再清洗,用吸管吸干后加入5ml 含20%血清的培養(yǎng)液。

(5)用彎頭吸管吸取組織小塊,均勻地置于培養(yǎng)皿內(nèi)表面,吸去多余的培養(yǎng)液,各組織小塊之間相距0.5cm 為宜。蓋好培養(yǎng)皿蓋,做好標(biāo)記, 置37°C 的CO2培養(yǎng)箱內(nèi)。

(6) 2~4h 后,于超凈工作臺(tái)中,緩緩地向培養(yǎng)皿中加入上述含20%血清及雙抗溶液( 100U/ml 及100μg/ml )的培養(yǎng)液少量,以使組織塊浸沒(méi)在培養(yǎng)液中。

(7)輕輕地將培養(yǎng)皿及組織塊移至CO2 培養(yǎng)箱, 如無(wú)特殊情況,不必觀察。1~2 周后,可觀察到細(xì)胞從組織塊邊緣長(zhǎng)出,形成生長(zhǎng)暈。

(9) 一般說(shuō)來(lái),若培養(yǎng)液無(wú)明顯改變, 1 周換液1 次即可。待細(xì)胞長(zhǎng)滿整個(gè)培養(yǎng)皿內(nèi)表面,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。


大鼠骨骼肌衛(wèi)星細(xì)胞

細(xì)胞基本屬性:

產(chǎn)品名稱

大鼠骨骼肌衛(wèi)星細(xì)胞

組織來(lái)源

肌肉組織

種屬

大鼠

生長(zhǎng)特性

貼壁生長(zhǎng)

形態(tài)特征

成纖維細(xì)胞樣

英文名稱

詳見(jiàn)說(shuō)明

貨號(hào)

EY-XY3525

規(guī)格

5x105cells/T251mL凍存管

質(zhì)量檢測(cè):肌動(dòng)蛋白(α-actin)免疫熒光染色為陽(yáng)性,純度高于 90%,且不含有HIV-1HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等

產(chǎn)品規(guī)格:5x105cells/T251mL凍存管

培養(yǎng)基:大鼠骨骼肌衛(wèi)星細(xì)胞專用培養(yǎng)基

培養(yǎng)條件:氣相:95%空氣+5%二氧化碳;溫度:37

換液頻率:每2-3天換液一次

消化液:0.25%

產(chǎn)品貨期現(xiàn)貨,1周左右

運(yùn)輸方式T25培養(yǎng)瓶/ 順豐快遞(包郵)

供應(yīng)限制僅限于科學(xué)研究,絕不可作為動(dòng)物或人類疾病的治療產(chǎn)品使用

背景介紹:

大鼠骨骼肌衛(wèi)星細(xì)胞采用-膠原酶混合消化法結(jié)合多次差速貼壁法制備而來(lái)。肌衛(wèi)星細(xì)胞指骨骼肌中除骨骼肌纖維(肌細(xì)胞)外的一種扁平、有突起的細(xì)胞。附著于肌纖維(肌細(xì)胞)表面;當(dāng)肌纖維(肌細(xì)胞)受損后,肌衛(wèi)星細(xì)胞可增殖分化,參與肌纖維(肌細(xì)胞)的修復(fù),因此具有干細(xì)胞性質(zhì)。骨骼肌又稱橫紋肌,肌肉中的一種,約占全身重量的40%。骨骼肌纖維為長(zhǎng)柱形的多核細(xì)胞,肌膜的外面有基膜緊密貼附。屬于橫紋肌,橫紋肌還包括心肌與內(nèi)臟橫紋肌,其中骨骼肌主要分布于四肢。每塊肌肉都是具有一定形態(tài)、結(jié)構(gòu)和功能的器官,有豐富的血管、淋巴分布,






QQ截圖20240105153042.png

公司正在出售的產(chǎn)品:

嗅覺(jué)受體5R1抗體

細(xì)胞甘油-3-磷酸脫氫酶-2Glycerol-3-Phosphate Dehydrogenase-2)活性比色法定量檢測(cè)試劑盒

非同位素APBCIP/NBTRNA北方雜交試劑盒

植物乙醇酸氧化酶(glycolate oxidase)活性比色法定量檢測(cè)試劑盒

載玻片細(xì)胞PP2A蛋白表達(dá)熒光顯微鏡檢測(cè)試劑盒

通用型甜菜壞死黃脈病毒(Beet Necrotic Yellow Vein Virus; BNYVV)基因檢測(cè)試劑盒

血液鎂離子(Mg)濃度酶反應(yīng)光譜法定量檢測(cè)試劑盒

血液亞鹽含量熒光定量檢測(cè)試劑盒

真菌/酵母菌ATP發(fā)光法定量檢測(cè)試劑盒

血液氨基脲敏感性胺氧化酶(SSAO)活性熒光定量檢測(cè)試劑盒

細(xì)菌糖酵解酚紅瓊脂平板

PDGF-B蛋白免疫共沉淀分析試劑盒

血液麥芽糖含量酶連續(xù)反應(yīng)光譜法定量檢測(cè)試劑盒

人體Methyl tetrahydrofolate reductase RFLP基因分析試劑盒

細(xì)胞NEK6激酶活性定量檢測(cè)試劑盒(A/B/C

SiRNA大量SperfusinX脂質(zhì)體腹腔法動(dòng)物轉(zhuǎn)染試劑盒

脂氧素受體1抗體

鉻細(xì)胞瘤患者抑癌基因SDHB重組兔單克隆抗體

妊娠特異性糖蛋白6抗體

LYRM7蛋白抗體

細(xì)胞信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)分子SMAD3重組兔單克隆抗體

癌胚抗原單克隆抗體(檢測(cè))

磷酸丙糖異構(gòu)酶抗體

大鼠骨骼肌衛(wèi)星細(xì)胞B細(xì)胞淋巴瘤蛋白3抗體


操作方法:

組織塊直接培養(yǎng)法(原代細(xì)胞培養(yǎng)實(shí)驗(yàn))

材料與儀器

【動(dòng)物】選擇大約一半足孕時(shí)間的胚胎,10-13天齡胚胎含有最大數(shù)量的未分化的間質(zhì)細(xì)胞,成纖維細(xì)胞可從這些細(xì)胞衍生獲得。每組小鼠胚胎1個(gè)【實(shí)驗(yàn)材料】每組的超凈臺(tái)中有以下物品:1.50ml配制好的RPMI1640培養(yǎng)液1瓶;8ml小牛血清(FCS)1瓶;100ml 0.25%瓶;PBS(-)1瓶2.100ml滅菌燒杯2個(gè);3、50ml離心筒2個(gè)4、滅菌培養(yǎng)皿1個(gè),細(xì)胞培養(yǎng)瓶1個(gè)5、1ml,200μl移液器各1支;槍頭盒2個(gè);無(wú)菌玻璃攪拌棒1個(gè)6、細(xì)胞計(jì)數(shù)板1塊;7、滅好菌的鑷子1把,剪刀1把;8、酒精燈1臺(tái);

步驟

1) 胚胎的分離。適用哺乳動(dòng)物(倉(cāng)鼠、小鼠和大鼠)2)將1-2個(gè)胚胎轉(zhuǎn)移至一個(gè)小的無(wú)菌培養(yǎng)皿中,用新的無(wú)菌剪刀小心地絞碎胚胎,用PBS漂洗。3)在無(wú)菌狀態(tài)下,將絞碎的胚胎轉(zhuǎn)移于一50ml的無(wú)菌離心筒中,加入40ml 0.25%的無(wú)菌,用攪拌棒輕輕攪動(dòng)。4)在溫暖的環(huán)境中或置于37°C培養(yǎng)箱中輕輕搖動(dòng)15分鐘。5)讓存留的組織塊在重力作用下慢慢沉降,將含有懸浮細(xì)胞的液體轉(zhuǎn)移至一無(wú)菌50ml的離心管中,該管內(nèi)按照每10ml上清加入l ml小牛血清的比例加入牛血清以滅活,。6)加人新鮮溶液(見(jiàn)前述步驟)于含有殘留未消化組織塊的原來(lái)的50ml離心筒中,重復(fù)步驟4和5。7)離心混合的細(xì)胞懸液,1200r/rain,5分鐘,棄上清。8)用新鮮的無(wú)菌PBS重懸沉淀的細(xì)胞,按步驟7再次離心。9)用PBS反復(fù)洗滌細(xì)胞直至上清清亮為止。


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